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http://repositorio.utfpr.edu.br/jspui/handle/1/13977| Título: | Fenotipagem e análise de expressão gênica em resposta a germinação pré-colheita em trigo |
| Título(s) alternativo(s): | Phenotyping and gene expression analysis in response to pre-harvest germination in wheat |
| Autor(es): | Madureira, Alana |
| Orientador(es): | Finatto, Taciane |
| Palavras-chave: | Trigo - Cultivo Trigo - Germinação Sementes - Fisiologia Marcadores genéticos Wheat - Planting Wheat - Germination Seeds - Physiology Genetic markers |
| Data do documento: | 27-Nov-2018 |
| Editor: | Universidade Tecnológica Federal do Paraná |
| Câmpus: | Pato Branco |
| Citação: | MADUREIRA, Alana. Fenotipagem e análise de expressão gênica em resposta a germinação pré-colheita em trigo. 2018. 46 f. Trabalho de Conclusão de Curso (Graduação) - Universidade Tecnológica Federal do Paraná, Pato Branco, 2018. |
| Resumo: | O trigo (Triticum aestivum L.) é um cereal de grande importância econômica, por ser matéria-prima de inúmeros produtos na indústria alimentícia. Um dos fatores que afetam negativamente a cultura em nível de campo é a geminação pré-colheita, reduzindo a produtividade e qualidade dos grãos, a ponto de reduzir seu valor comercial e inviabilizar a sua utilização para alimentação humana. Desta forma, este trabalho teve o objetivo de fenotipar e analisar a expressão do gene da enzima metiltransferase, em cultivares suscetíveis e resistentes, a fim de identificar alterações na expressão gênica que possam estar associadas aos maiores níveis de resistência. Para a fenotipagem foi conduzido um experimento em casa de vegetação, onde foram avaliadas quatro cultivares de trigo contrastantes quanto à resistência a germinação pré-colheita. O plantio foi realizado em vasos, em delineamento experimental de blocos ao acaso com três repetições. Na maturidade fisiológica (Z90), foi realizada a coleta das espigas para fenotipagem, sendo utilizadas duas metodologias: BRASIL (2009) e Nörnberg (2015), também foram coletadas espigas para as análises moleculares. A extração de RNA foi realizada de acordo com o método descrito por Zeng e Yang (2002). Em seguida, o RNA foi tratado com a enzima DNAse, onde realizou-se a síntese de cDNA para utilização na análise de PCR semi-quantitativa. Foi analisada expressão do gene codificador da enzima Metiltransferase como alvo, e o gene codificador da Tubulina como referência. A magnitude de expressão de cada gene foi avaliada por meio de densitometria das bandas amplificadas em gel de agarose. Os resultados encontrados demostraram que o método de espiga debulhada de, Nornberg et al. (2015) propiciou uma melhor diferenciação das cultivares, e pode ser considerado mais eficiente para a caracterização dos genótipos quanto a germinação précolheita. E a análise de expressão gênica sugere que a manutenção do DNA metilado pode ser um fator que contribui para a resistência a germinação na précolheita em trigo, pois as cultivares resistentes apresentam maior acúmulo de transcritos do gene codificador da metiltranferase. |
| Abstract: | Wheat (Triticum aestivum L.) is a cereal of great economic importance, since it is the raw material for many products in the food industry. One of the factors that negatively affect field-level culture is pre-harvest twinning, reducing grain yield and quality, to the point of reducing its commercial value and making it unfeasible for human consumption. In this way, this work aimed to phenotype and analyze the expression of the methyltransferase enzyme gene in susceptible and resistant cultivars, in order to identify alterations in gene expression that may be associated to higher levels of resistance. The experiment was conducted under greenhouse conditions. Four contrasting wheat cultivars were evaluated for resistance to preharvest germination. Planting was carried out in pots, in a randomized complete block design with three replications. In the physiological maturation stage (Z90), the harvests were harvested for phenotyping, using two methodologies: BRASIL (2009) and Nörnberg (2015), the collection of spikes was also performed for molecular analyzes. RNA extraction was performed according to the method described by Zeng and Yang (2002). Then, the RNA was treated with the enzyme DNAse, where cDNA synthesis was performed for use in semi-quantitative PCR analysis. The target gene of the enzyme Methyltransferase, and the Tubulin gene as a reference, were analyzed. The magnitude of expression of each gene was evaluated by means of densitometry of the amplified bands. The results show the importance of the joint execution of the phenotyping method for an efficiency during the classification process of new cultivars with germination resistant genes in the pre-harvest, and the analysis of genetic expression suggests that the maintenance of the methylated DNA can be a factor that contributes to the resistance to germination in the pre-harvest in wheat, because the resistant cultivars present greater accumulation of transcripts of the gene encoding methyltranferase. |
| URI: | http://repositorio.utfpr.edu.br/jspui/handle/1/13977 |
| Aparece nas coleções: | PB - Agronomia |
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