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Título: Comparação entre métodos de extração de DNA em tecido ósseo: método orgânico com digestão pela proteinase K e método com movimento de precessão: utilizando como parâmetros a eficiência de amplificação de STRs autossômicos
Autor(es): Marini, Maria Christina
Orientador(es): Faria, Rubens Alexandre de
Palavras-chave: Ossos
Identificação
Engenharia biomédica
Bone
Identification
Biomedical engineering
Data do documento: 18-Dez-2014
Editor: Universidade Tecnológica Federal do Paraná
Câmpus: Curitiba
Citação: MARINI, Maria Christina. Comparação entre métodos de extração de DNA em tecido ósseo: método orgânico com digestão pela proteinase k e método com movimento de precessão: utilizando como parâmetros a eficiência de amplificação de STRs autossômicos. 2014. 77 f. Dissertação (Mestrado em Engenharia Biomédica) - Universidade Tecnológica Federal do Paraná, Curitiba, 2016.
Resumo: Osso é o tecido mais desafiador para extração e purificação de DNA. Sistemas comerciais equipamentos específicos são frequentemente usados em Laboratórios Forenses para esse objetivo. Este trabalho se concentra principalmente na comparação de dois métodos de extração de DNA de células degradadas de tecido ósseo. Neste contexto, é descrito o método clássico e já apresentado pelos Laboratórios Forenses, que utiliza a proteinase K. Será proposto um método ainda não utilizado rotineiramente em Laboratórios Forenses de Genética Molecular, que se baseia em um dispositivo que imprime na amostra um movimento de precessão. Após um exaustivo levantamento dos casos processados no Laboratório de Genética Molecular Forense da Polícia Científica do Estado do Paraná, do ano de 1998 até o ano de 2013, foram encontrados 817 casos de identificação humana, dos quais 527 foram encaminhados ao orgão solicitante, com resultados conclusivos, sendo 463 foram inclusões e 64 exclusões. Dos casos restantes, 85 foram processados por diversas vezes, sem resultados conclusivos, frente à impossibilidade técnica para extração de DNA da célula, até os dias de hoje. Os 205 não correspondiam às características necessárias para este trabalho. Dos 85 casos com resultados inconclusivos, foram utilizadas neste trabalho 45 amostras já extraídas. Os outros 40 casos não foram utilizados para não prejudicar o arquivo do Laboratório.
Abstract: The bone is the most challenging tissue for DNA extraction and purification. Expensive commercial kits and specific equipment are often used in forensic laboratories towards that goal. This paper focuses primarily on comparing two methods of DNA extraction from cell degraded bone tissue. In this context is described the classic method and already filed by the forensic laboratories, which uses proteinase K and will be proposed a method not yet routinely used in Forensic Laboratories of Molecular Genetics, which is based on a device that produces a movement of precession. After an exhaustive survey in the archives of the Molecular Genetics Laboratory of Forensic Paraná State Forensic Science, between the years 1998 and 2013, were found 817 cases of human identification, of which 527 with conclusive results, of which 463 were inclusions and 64 exclusions. Of the remaining cases, 85 were processed several times without conclusive results, for technical impossibilities until the present day. The remaining 205 cases were cataloged in the archives of the Laboratory as no appointment, not leave report, canceled, and various tissues. The remaining 85 cases with inconclusive results, were used in this study 45 samples already extracted. The other 40 cases contained very little sample, or were used until the end of the samples sent.
URI: http://repositorio.utfpr.edu.br/jspui/handle/1/1994
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