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Título: Extração de compostos hidrossolúveis do arilo carnoso (endocarpo) da Passiflora edulis f. flavicarpa e avaliação de sua atividade citotóxica/antitumoral
Título(s) alternativo(s): Extraction of water-soluble compounds from the fleshy aryl (endocarp) of Passiflora edulis f. flavicarpa and evaluation of its cytotoxic/antitumor activity
Autor(es): Silva, Israel Keller
Orientador(es): Düsman, Elisângela
Palavras-chave: Agentes antiinfecciosos
Maracujá
Câncer
Anti-infective agents
Passion fruit
Cancer
Data do documento: 20-Mai-2021
Editor: Universidade Tecnológica Federal do Paraná
Câmpus: Francisco Beltrao
Citação: SILVA, Israel Keller. Extração de compostos hidrossolúveis do arilo carnoso (endocarpo) da Passiflora edulis f. flavicarpa e avaliação de sua atividade citotóxica/antitumoral. 2021. Trabalho de Conclusão de Curso (Bacharel em Engenharia Química) – Universidade Tecnológica Federal do Paraná, Francisco Beltrão, 2021.
Resumo: O maracujá é originado na América tropical e possui mais de 150 espécies. O Brasil é grande produtor mundial da espécie Passiflora edulis f. flavicarpa, o maracujá amarelo. Ele possui cinco partes: o albedo, flavedo, o arilo carnoso (endocarpo), polpa e as sementes. O arilo carnoso apresenta benefícios a saúde humana, em função de seu conteúdo de compostos fenólicos, importantes para atividades antioxidantes, impedindo danos oxidativos e capazes de evitar doenças neurodegenerativas. Assim, o objetivo do presente estudo foi extrair compostos hidrossolúveis do arilo carnoso autoclavado da P. edulis f. flavicarpa e avaliar sua atividade citotóxica/antitumoral em células de carcinoma hepatocelular (CHC), na linhagem tumoral HuH7.5 humana, visando obter maiores conhecimentos sobre os efeitos celulares dessa parte do maracujá. O arilo carnoso do maracujá foi autoclavado, pois estudos prévios indicaram maiores quantidades de compostos fenólicos na farinha autoclavada do albedo do maracujá em relação a farinha do albedo sem tratamento. Para avaliar o efeito das variáveis experimentais de extração, foi empregado o planejamento experimental DCCR (delineamento composto central rotacional) 22, com duas variáveis independentes (tempo e temperatura de extração), sendo a variável resposta a concentração de compostos fenólicos. Os ensaios de extração foram realizados com o arilo carnoso seco e autoclavado, em banho ultrassônico, com uma agitação constante de 100 rpm na temperatura e no tempo de extração definidos pelo delineamento experimental. Os extratos aquosos foram filtrados a vácuo através de filtro tecido sintético de trama fechada (poliéster) e acondicionados em tubos de ensaio com concentração inicial de 0,025 g mL-1. Os resultados obtidos a partir do DCCR 22 mostraram que na temperatura de 90,0 °C e no tempo de 27,0 min, foi definido o ponto ótimo da curva. Porém, foram utilizados os valores de 78,4 °C e 26,5 min para temperatura e tempo de extração, respectivamente, pois estes apresentaram os valores de máxima extração de compostos fenóicos, sendo ambas as variáveis avaliadas estatisticamente significativas. A análise físico-química deste extrato mostrou seu caráter ácido, com valor de pH 3,97, e com 10,54% de acidez total, além de 3,5 °Brix de sólidos solúveis, explicado pelo baixo estado de maturação do fruto, e sua umidade foi de 8,41%. O teste de citotoxicidade do MTT com as células HuH7.5 mostrou que todas as concentrações (exceto a de 300 μg mL-1), nos três tempos de avaliação (24, 48 e 72 horas) apresentaram absorbâncias médias maiores e diferentes estatisticamente do controle negativo, com efeito indutor da proliferação celular. Assim, os dados do presente estudo mostram que, apesar do elevado rendimento de extração (39,60%) e da presença de antioxidantes no extrato produzido (49,20% de inibição do DPPH em 30 minutos), outras linhagens tumorais devem ser avaliadas, buscando identificar melhor atividade biológica do extrato aquoso do arilo carnoso autoclavado do maracujá produzido.
Abstract: Passion fruit originates in tropical America and has more than 150 species. Brazil is a biggest world producer of the Passiflora edulis f. flavicarpa, the yellow passion fruit. It has five parts: the albedo, flavedo, the fleshy aryl (endocarp), pulp and the seeds. The flashy aryl presents benefits to human health, due to its content in phenolic compounds, which are important for antioxidant activities, preventing oxidative damage and capable of preventing neurodegenerative diseases. Therefore, the objective of the present study was to extract water-soluble compounds from the autoclaved fleshy aryl of P. edulis f. flavicarpa and evaluate its cytotoxic/antitumor activity in hepatocellular carcinoma (HCC) cells, in the human HuH7.5 tumor lineage, in order to obtain greater knowledge about the cellular effects of this part of the passion fruit. The fleshy aril of passion fruit was autoclaved, because previous studies indicated higher amounts of phenolic compounds in the autoclaved flour of passion fruit albedo compared to untreated albedo flour. To evaluate the effect of the experimental extraction variables, the experimental design DCCR (central rotational composite design) 22 was used, with two independent variables (extraction time and temperature), the response variable being the concentration of phenolic compounds. The extraction tests were carried out in an ultrasonic bath, with a constant agitation of 100 rpm at the temperature and extraction time defined by the experimental design. The aqueous extracts were vacuum filtered through a synthetic woven filter (polyester) and placed in test tubes with an initial concentration of 0.025 g mL-1. The results obtained from the DCCR 22 showed that at a temperature of 90.0 °C and at the time of 27.0 min, the optimal point of the curve was defined. However, the values of 78.4 °C and 26.5 min were used for temperature and extraction time, respectively, as they presented the maximum extraction values for phenolic compounds, both variables being statistically significant.. The physical-chemical analysis of this extract showed that it has an acid character, with a pH value of 3.97 and 10.54% of total acidity, in addition to 3.5 ° Brix of soluble solids, which can be explained by the low state maturation period, and its moisture was 8.41%. The MTT cytotoxicity test with human hepatocellular carcinoma cells line HuH7.5, showed that all concentrations (except 300 μg mL-1), in the three evaluation times (24, 48 and 72 hours) showed higher mean absorbances and statistically different from the negative control, with an effect of cell proliferation. Thus, the data from the present study show that, despite the high extraction yield (39.60%) and the presence of antioxidants in the extract produced (49.20% DPPH inhibition in 30 minutes), other tumor strains must be evaluated, seeking to identify the biological activity of the aqueous extract of the autoclaved fleshy aril of the passion fruit produced.
URI: http://repositorio.utfpr.edu.br/jspui/handle/1/26284
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