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http://repositorio.utfpr.edu.br/jspui/handle/1/6948| Título: | Ensaios com primers de ISSR e PCR para estudo da variabilidade genética de Tetragonisca angustula (Latreille, 1811) (Hymenoptera, Apidae, Meliponinae) na região de Campo Mourão - Paraná |
| Autor(es): | Oliveira, Thainá Dal Pozzo de |
| Orientador(es): | Bueno, Paulo Agenor Alves |
| Palavras-chave: | Marcadores genéticos Abelha Genética - Pesquisa Biologia molecular Genetic markers Bees Genetics - Research Molecular biology |
| Data do documento: | 2-Fev-2015 |
| Editor: | Universidade Tecnológica Federal do Paraná |
| Câmpus: | Campo Mourao |
| Citação: | OLIVEIRA, Thainá Dal Pozzo de. Ensaios com primers de ISSR e PCR para estudo da variabilidade genética de Tetragonisca angustula (Latreille, 1811) (Hymenoptera, Apidae, Meliponinae) na região de Campo Mourão - Paraná. 2015. 50 f. Trabalho de Conclusão de Curso (Graduação) – Universidade Tecnológica Federal do Paraná, Campo Mourão, 2015. |
| Resumo: | As abelhas pertencentes à tribo Meliponini ocupam as regiões tropicais e subtropicais do planeta, abrangendo cerca de 60 gêneros. Seu importante papel é o serviço de polinização, sendo consideradas a peça chave na manutenção de ecossistemas. Tetragonisca angustula é um meliponíneo que distribui-se em praticamente toda a América Latina, adapta-se bem a diferentes substratos para nidificação, aceita manejo pelo homem e produz mel de sabor muito apreciado. Visto a importância desses organismos, os mesmos devem ser conservados, a fim de evitar a endogamia e possível extinção, permitindo com que mantenham assim o maior potencial evolutivo possível. Para tal, a genética torna-se uma aliada, a fim de determinar o grau de diferenciação genética entre eles. O presente estudo teve como objetivo a análise dessa variabilidade em Tetragonisca angustula por meio de marcadores moleculares ISSR. As abelhas foram coletadas nos municípios paranaenses de Iretama e Campo Mourão. Foi analisada uma operária por colônia, em 12 diferentes colônias. Após as coletas, as amostras foram posteriormente submetidas às etapas laboratoriais de Extração de DNA, PCR e eletroforese em gel de agarose. Após estes procedimentos, não foram evidenciadas bandas de DNA migradas no gel de agarose. Portanto, devido a este resultado, 11 diferentes primers ISSR foram testados a fim de encontrar sequências e temperaturas ideais de anelamento para a reação de amplificação do mesmo, e assim visualizar as bandas de DNA, para posteriormente analisar o grau de diferenciação genética desses indivíduos. Para tanto, nenhum dos primers testados responderam de forma esperada, ainda não sendo visualizados quaisquer fragmentos de material genético. Assim, pode-se inferir sobre a não funcionalidade dos primers ISSR utilizados neste trabalho para a espécie em questão e para as temperaturas adotadas para a reação de PCR. Nesse sentido, este trabalho foi adaptado para seleção e otimização das técnicas metodológicas adotadas para o estudo do grau de diferenciação genética dos indivíduos citados, mantendo o foco da importância do estudo genético em populações naturais como biondicadores de fragmentação florestal. |
| Abstract: | The bees belonging to Meliponini tribe live in tropical and sub-tropical areas in the planet, covering an average of 60 genders. Its importance role is pollination, regarding the key piece of ecosystem maintenance. Tetragonisca angustula is a Meliponini that spread in almost all Latin America, adjusts well to different substrates to nests, accepts been handled by man and produces pleasant sweet taste honey. Due to its importance, they must be conserved, in order to avoid inbreeding and a possible extinction, make it possible keep up with the biggest evolutionary potential. For such, genetic becomes allied with, in order to determine the differential degree of gene between them. This way, the present study aimed to analyze this variability in Tetragonisca angustula throughout molecular marker ISSR. The bees were collected in Iretama and Campo Mourão cities. Its was analyzed a worker bee by colony, in 12 different colonies. After collecting, the samples were put through laboratoty procedures of DNA extraction, PCR and agarose gel electrophoresis, next, there was no evidence DNA band migrate through agarose gel. Therefore, due to this result, 11 different primers ISSR were tested in order to find out ideal sequence and temperature of annealing to its reaction and amplification, and then see the DNA band, after that analyze differential degree of gene of them. To this end, no primers tested replied to what was expected, so it could not be seen any fragment of genetic material. This way, we can infer that ISSR primers functionality used in this work was not successful to the species and to temperatures related to PCR reaction. In this sense, this work was adapted to selection and optimization of methodology techniques adopted to the study of the differential degree of gene cited, keeping up the focus on importance of genetic study in natural population as bioindicators of forest fragmentation. |
| URI: | http://repositorio.utfpr.edu.br/jspui/handle/1/6948 |
| Aparece nas coleções: | CM - Engenharia Ambiental |
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